CytoSense se centra en las propiedades de partículas individuales, en grandes cantidades. Las tecnologías de análisis a granel, por otro lado, analizan un volumen completo de muestra directamente. Esto es suficiente si desea partículas totales o clorofila, o una distribución de tamaño bruto. Las cosas cambian si desea determinar la composición de una suspensión de partículas mixtas o muestra microbiana con precisión. En los ecosistemas acuáticos, es posible que incluso desee detectar y analizar especies menos abundantes, emergentes o raras entre los grupos dominantes. Ahora deberá analizar una gran cantidad de partículas únicas e individuales; otros métodos fallarán. Al igual que la microscopía tradicional, básicamente, pero si desea que sus resultados sean rápidos y frecuentes, necesitará un instrumento de análisis de partículas individuales automatizado: ¡nuestro citómetro de flujo CytoSense!

En la citometría de flujo, una corriente de partículas y / o células en el agua se dirige a alta velocidad a través de un potente rayo láser. La corriente es tan estrecha que las partículas y las células pasan en una sóla fila, una por una. Midiendo la dispersión de la luz láser mientras pasa cada partícula y detectando la posible fluorescencia emitida por los pigmentos intracelulares, las partículas pueden identificarse y contarse. Este es un método extremadamente rápido y extremadamente preciso. Se pueden analizar múltiples miles de partículas por segundo, y cada partícula deja una huella característica de su forma y estructura interna. 

Un citómetro de flujo tradicional produce un pequeño conjunto de números para cada partícula analizada. Tal conjunto consiste en los valores de salida de cada detector, típicamente un detector de dispersión directa y un detector de dispersión lateral y tres detectores de fluorescencia para las partes 'verde', 'amarilla' y 'roja' del espectro. En este caso, estos 5 números se capturan para cada partícula, generando un archivo de datos de modo de lista: largas listas de números que representan partículas. Esto se denomina datos multivariados porque cada conjunto de datos representa información de cinco entidades ópticas o 'variables' detectadas diferentes.

No tanto el CytoSense. En lugar de valores individuales por partícula, la máquina registra una huella completa de datos por partícula, una imagen de silicio.

Las partículas de cierto tipo de especies tienen propiedades ópticas más o menos similares. Las partículas grandes generalmente dispersan más luz que las partículas pequeñas, por lo que para encontrar un grupo de celdas grandes en los datos necesitamos encontrar conjuntos de partículas que tengan al menos un número de dispersión hacia adelante alto y presumiblemente con cierta similitud. Debido a que la clorofila en las células de fitoplancton emite luz roja al pasar el foco láser azul, podemos usarla para separar las células de fitoplancton del zooplancton y las partículas de sedimento. Supongamos que encontramos un grupo de células grandes y / o partículas usando sus propiedades de dispersión de la luz, el siguiente paso sería ver qué números de fluorescencia encontramos en sus conjuntos de datos: las partículas con un número mínimo de fluorescencia roja en su conjunto de datos representan el fitoplancton. células. Este proceso puede repetirse para una mayor discriminación de subgrupos. Con miles de partículas medidas, una lista simple de todos estos conjuntos de números es engorrosa. Estos números se visualizan por lo tanto en múltiples diagramas de dispersión y distribuciones. La selección de un 'grupo' o grupo en una parcela muestra inmediatamente su posición en todas las otras parcelas para una mayor discriminación. Más importante: ¡este tipo de análisis también se puede automatizar!

Los instrumentos CytoBuoy utilizan un tipo de citometría de flujo de exploración (imágenes de silicio). Por partícula se registran formas de pulso completas, en oposición a puntos de datos individuales en citómetros de flujo convencionales. Esto permite una mejor clasificación de partículas y la detección de, por ejemplo, la ubicación de estructuras celulares internas específicas.

Además, el rango de tamaño del CytoSense es extremadamente grande en comparación con otros citómetros de flujo. Se detectará cualquier cosa desde aproximadamente 1 micrómetro o menos, hasta cualquier cosa que ingrese al tubo de 1 mm. Tal rango lo convierte en un instrumento versátil y excepcional. Diseñamos CytoSense para permitir una operación autónoma e in situ, en un marco de suspensión a bordo o en la boya esférica especial de 90 cm (CytoBuoy), por ejemplo, mediante radio o telemetría WiFi. Un CytoSense equipado con un sistema de muestra de alta presión y una carcasa de aluminio pesado que llamamos CytoSub, para uso sumergido hasta la zona fotónica completa de 200 metros, con soluciones de alimentación y datos. 

El proceso de escaneo de una partícula mediante adquisición directa y digitalización de múltiples cursos de salida del detector mientras atraviesa el foco del rayo láser que llamamos imágenes de silicio. Resulta en un conjunto de formas de pulso completas para cada canal de salida del detector disponible en el instrumento, para cada partícula analizada. Estas formas de pulso son características de la forma y los componentes funcionales, por ejemplo, 'partes del cuerpo' de la partícula. Aunque este formato de datos CytoSense produce muchos más datos que los datos del modo de lista FCM normal, se pueden adquirir más de 1000 escaneos (partículas) por segundo. ¡Imagínese cuánta información le proporciona esto sobre una muestra!

Aunque son capaces de analizar miles de partículas por segundo, los citómetros de flujo solo miden unas pocas entidades ópticas por celda. Las velocidades de datos del modo de lista citométrica de flujo son enormes y las imágenes de silicio de CytoSense se capturan a velocidades superiores a 1000 / s. La captura de fotos reales a la misma velocidad fácilmente inundaría un disco duro por día. Sin embargo, las fotografías son muy útiles para la identificación visual de grupos de datos. Por lo tanto, CytoSense se puede actualizar con el denominado módulo de generación de imágenes en flujo dirigido. Este módulo toma una cantidad limitada de imágenes de grupos objetivo preseleccionados en el espacio de datos. Ese grupo objetivo puede entonces ser identificado. Esto maximiza la profundidad de la información en una situación de transferencia de datos limitada, como los sistemas amarrados que utilizan telemetría de adquisición de datos. Cada foto viene con la imagen silico correspondiente junto con ella.

El instrumento estándar CytoSense mide 31 cm de diámetro y 55 cm de altura. Cuando se coloca en su marco de mesa, tiene una huella de 37 cm x 37 cm, y la altura se incrementa en aproximadamente 20 cm. El instrumento pesa aproximadamente 20 kg. Estas cifras pueden variar con las actualizaciones aplicadas. El casco de un CytoSub no aumenta el tamaño del instrumento, pero lo hace un poco más pesado (aunque puede ser transportado por una persona). En agua es aproximadamente neutralmente flotante.

Sí, también a un CytoBuoy. Todas las actualizaciones del detector, el segundo módulo láser, el módulo de imágenes en flujo, el sensor de profundidad, etc. se ajustan dentro de la carcasa de Ø300 mm y están disponibles para su posterior adaptación para el despliegue de laboratorio, amarrado y sumergido.

Sí, el CytoSub puede ser sacado de la carcasa de alta presión y ser colocado en la mesa de trabajo en una carcasa de laboratorio normal con un anillo adaptador. El espiral de muestreo de alta presión se puede desacoplar fácilmente y el instrumento puede ser usado como un CytoSense de sobremesa normal. 

Esta página nunca está terminada, así que si tiene preguntas sobre los instrumentos CytoBuoy que no están en esta página, o si desea preguntar sobre las posibilidades en su situación específica, no dude en contactarnos .

Si ya es cliente de CytoBuoy, inicie sesión para echar un vistazo a los foros de soporte y hacer su pregunta allí.